Hogyan lehet kiszámítani a holtidőt egy folyadékkromatográfia oszlopban

Szerző: Bobbie Johnson
A Teremtés Dátuma: 5 Április 2021
Frissítés Dátuma: 17 November 2024
Anonim
Hogyan lehet kiszámítani a holtidőt egy folyadékkromatográfia oszlopban - Tudomány
Hogyan lehet kiszámítani a holtidőt egy folyadékkromatográfia oszlopban - Tudomány

Tartalom

A kromatográfiát széles körben használják kémiai laboratóriumokban egy ismeretlen komponens azonosságának meghatározására. Ez a komponens átfolyik az oszlop burkolóanyagán, és kölcsönhatásba lép a részecskékkel. A részecskék és a mintában lévő komponensek közötti kölcsönhatások a közöttük lévő vonzerőn vagy oldhatóságon alapulnak. Azokat a molekulákat, amelyek nincsenek kölcsönhatásban a köpenyanyag részecskéivel, akadálymentesen engedik át rajta. Az az idő, amely ahhoz szükséges, hogy a molekulák átjussanak az injekciós pontról a rendszerre a nem reaktív molekula maximális csúcsán, az oszlop holtideje.

1. lépés

Erősítse meg az ismeretlen mintát kis mennyiségű vegyülettel, amelyet az oszlop anyaga nem tart meg. A vegyület áthalad az oszlopon anélkül, hogy kölcsönhatásba lépne az oszlopban lévő csomagolóanyaggal.


2. lépés

Töltsön be kb. 20 mikroliter mintát a fecskendőbe, és helyezze a tűt az injekciós nyílásba. Töltse be a mintahurkot a szelepből úgy, hogy kiüríti a fecskendőt a szelepbe.

3. lépés

Kapcsolja be a kromatográfiás műszert és indítsa el a mozgófázist. Ez a fázis átáramlik a műszeren, és átveszi a mintát az oszlopon és a detektoron, amely egy hulladékgyűjtő tartályban végződik.

4. lépés

Aktiválja a szelepet, amely lehetővé teszi a minta belépését a folyadék áramlási útjába. Ez betölti a minta komponenseit az oszlop tetejére, és megkezdődik az elválasztás.

5. lépés

Figyelemmel kíséri a detektor emitter jelét, és azonosítsa a kromatográf első csúcsát. A befecskendezési idő és az első csúcs maximuma, amelyet a megerősítő komponens képvisel, különbség a holtidő.

6. lépés

Mérje meg az injekciós pont és az első csúcs maximális magassága közötti távolságot. Szorozza meg a távolságot a papír vagy a tengely sebességével, hogy megtalálja a holtidőt.