Tartalom
A cetil-trimetil-ammónium-bromid, a hexadecil-trimetil-ammónium-bromid, a palmitil-trimetil-ammónium-bromid és a cetrimónium-bromid kémiai vegyületeket a CTAB is ismert. A kémiai anyagot a DNS szekvenciális genomjában, különösen a növényekben pH fenntartóként használjuk.
CTAB képlet
A különböző CTAB vegyszerek képletei a laboratóriumtól függően eltérőek. Mindazonáltal az összes alkotórész az 1 M Tris HCl pH 8,0, 0,5 M EDTA, 5 M NaCl és H2O (néha kétszer desztillált). A CTAB komponens esetében néhány laboratóriumban cetil-trimetil-ammónium-bromidot és más hexadecil-trimetil-ammónium-bromidot használnak.
Növényi szövetek előállítása
A növényi szövet előállítása az anyagtól függően változhat. A falakat és a sejtmembránokat meg kell szakítani, hogy hozzáférjenek a nukleáris anyaghoz anélkül, hogy bármilyen bomlásra kerülne. Általában a marás során a folyékony nitrogénnel rendelkező növényi anyag hozzáférést biztosít a DNS-hez, a káros celluláris enzimeket és inaktív vegyi anyagokat tartva.
Szuszpenzió és centrifugálás
A zúzott szövetet a CTAB lapra helyezzük, és egy folyó vízbe tesszük. Ezután kloroformmal keverjük és centrifugáljuk az oldható fehérjék és más anyagok elválasztására. A DNS-t ezután kicsapjuk a vizes fázisból, és óvatosan mossuk, hogy eltávolítsuk a szennyező sókat. A tisztított DNS-t ezután visszahúzzuk és TE csúszdán vagy steril desztillált vízben tároljuk.