Tartalom
A tuberkulózis a Mycobacterium tuberculosis baktérium által okozott fertőző betegség, amely egy légzőszervi betegség, amelyet gumóképződések, nekrózis, tályogok, fibrózis és meszesedés jellemez a tüdőben. Megfertőzheti a veséket, a nyirokcsomókat, a csontokat, az ízületeket és a bőrt is.
Ennek a bacillusnak az elsődleges laboratóriumi diagnózisa magában foglalja a festést, hogy a baktériumok mikroszkóp alatt jelenjenek meg. A választott minta köpet vagy bronchoalveoláris átmosás a légúti fertőzés azonosítására vagy a tényleges szövet mintája.
Fiziológia
A Mycobacterium tuberculosis egy rúd alakú organizmus (bacillusok), nem mobil, nem kötelező spóra. Ez a baktérium 0,4x3 mikrométer hosszúságú, és 15–24 óránként bináris hasadáson megy át (a reproduktív sejt szétválása), ami más baktériumokkal összehasonlítva lassúnak számít. Emiatt a mikobaktériumok akár kilenc hétig is eltarthatnak, amíg megjelennek a táptalajban.
Ez a szervezet érzékeny az UV fényre és a hőre (például pasztőrözésre), de ellenáll a kémiai fertőtlenítőszereknek.
Gram-festés
A Mycobacterium tuberculosis valóban nem sorolható gram-pozitív vagy gram-negatív csoportba. Ezt a besorolást a baktérium sejtfalában lévő peptidoglikán mennyisége alapján végezzük. Egy gram-pozitív fajnak van egy vastag rétege ennek a molekulának (kb. 90%), míg a gram-negatív fajnak vékony rétege van (5% -tól 20% -ig). A gramfoltok behatolnak a sejtfalba, és a benne lévő kémiai komponensekhez kötődnek. Mikroszkóp alatt a festett baktériumok lilára vagy rózsaszínre váltanak.
Mycobacterium tuberculosis esetén a sejtfal peptidoglikánból áll, de komplex lipidekből is, amelyek gátolják a gramm festék behatolását. A sejtfal ellenáll a sav vagy az alkohol általi elszíneződésnek is, ezért a mycobacteriumot "savállónak" nevezik. A sejtfal lipidjei a mikolsav, a húrfaktor és a D-viasz. Ha a baktériumokat festenék, a sejtek gram-pozitívnak vagy kissé halványnak tűnnének, nagyon kevés színnel.
A baktériumok megtekintéséhez speciális foltokat kell használni, például Aumarine vagy Zhiel-Neelson foltot.
Aumarin-rodamin folt
Az auramin-rodamin felhasználásával végzett eljárás sárga fluoreszcens festéket használ a mycobacterium tuberculosis megjelenítésére fluoreszcens mikroszkóp alatt. Kálium-permanganát vagy akridin narancs használható kontrasztfestékként. A lencse alatt a baktériumsejtek zöldnek tűnnek.
Az auramin-rodamin festék érzékenyebb, mint Zhiel-Neelson, és gazdaságilag életképesebb.
Ziehl-Neelson színezés
A Ziehl-Neelson foltot Franz Ziehl és Friedrich Neelsen tudósok hozták létre, és fűtött karbol-fukszint, magas koncentrációjú sav-alkoholt és kontrasztfestéket használnak, például zöld malachitot vagy metilénkéket. Fluoreszcens mikroszkóp alatt a baktériumsejtek élénk rózsaszínűnek tűnnek.
A Ziehl-Neelson festék a kiválóság mércéje a mycobacterium tuberculosis és a mycobacterium leprae előzetes azonosításához.
Agar
A mikroszkópia azonosítása után a mycobacterium tuberculosist egy speciális agar kultúrán kell növeszteni. A Lowenstein-Jensen zselatin összetett szerves anyagokat tartalmaz (például tojás és burgonya), sókat, glicerint és malachitzöldet (amelyek gátolják más baktériumokat). Antibiotikumok adhatók a szennyező mikroorganizmusok további gátlásához. A mintát erre az agarra helyezzük, és a baktériumok három-kilenc hét alatt növekednek.
Tápanyag-tenyésztő oldat, például albumin és biotin használható a legkisebb mennyiségű célbaktérium szaporodásának támogatására is. Ezt Middlebrook 7H9 (vagy 7H12) néven ismerjük.
Mindkét közegben a telepek kicsi, csiszolt, világosbarna telepként jelennek meg.
Fejlett technológiával a mycobacterium tuberculosis ma már automatizált olvasó segítségével is termeszthető. Middlebrook 7H9 táptalaj folyékony oldatát és fluoreszcens indikátorvegyületet használunk a növekedés monitorozására és a pozitív vagy negatív fertőzés jelentésére.